Le temps de stérilisation standard en autoclave est d'un minimum de 15 minutes. Cependant, cette exigence de temps n'est efficace que lorsque la chambre de l'autoclave a atteint la température correcte de 121°C (250°F) et une pression de 15 psi. Le simple réglage d'une minuterie de 15 minutes n'est pas suffisant pour garantir la stérilisation.
La stérilisation dans un autoclave n'est pas seulement une question de temps ; c'est une fonction du temps, de la température et de la pression agissant ensemble. La norme de 15 minutes n'est valable que si la température et la pression correctes ont été atteintes et maintenues de manière constante pendant toute la durée de la phase d'exposition.
Les principes de la stérilisation à la vapeur
Pour utiliser correctement un autoclave, il est essentiel de comprendre que la minuterie n'est qu'une partie d'un processus plus vaste. Le véritable travail est effectué par la vapeur saturée à haute pression, qui transfère efficacement la chaleur pour tuer toute vie microbienne, y compris les spores bactériennes résistantes.
Pourquoi le temps seul n'est pas suffisant
Le « temps de stérilisation » ou « temps d'exposition » ne fait référence qu'à la période pendant laquelle le contenu est maintenu à la température de stérilisation.
Le cycle total est plus long et comprend une phase de « montée en température » pour que la chambre chauffe et se mette sous pression, et une phase d'« échappement » ou de « refroidissement ». L'horloge de 15 minutes ne devrait commencer qu'après la fin de la phase de montée en température.
La norme 121°C / 15 psi
La combinaison de 121°C et de 15 psi est la référence de l'industrie pour la stérilisation à la vapeur. À cette pression, l'eau devient de la vapeur surchauffée, qui peut pénétrer les matériaux et dénaturer rapidement les protéines essentielles des micro-organismes.
Cette température spécifique s'est avérée efficace pour détruire même les endospores bactériennes les plus résistantes à la chaleur, qui constituent le principal étalon-or pour un cycle de stérilisation réussi.
Facteurs qui modifient le temps requis
Bien que 15 minutes soit la base, cela ne convient qu'aux articles simples et non poreux. Vous devez ajuster le temps en fonction du contenu de l'autoclave pour vous assurer que la vapeur pénètre complètement dans toute la charge.
Taille et densité de la charge
Une charge volumineuse ou densément tassée prendra plus de temps pour que la vapeur pénètre jusqu'à son cœur. Une petite charge de béchers en verre lâches nécessite moins de temps qu'un grand sac de déchets étroitement emballé.
Pour les charges denses, le temps d'exposition peut devoir être augmenté à 30 minutes ou plus pour garantir que les articles au centre atteignent 121°C et y sont maintenus pendant la durée minimale.
Type de matériau
La nature des articles stérilisés est un facteur critique.
Les surfaces dures et non poreuses comme les instruments métalliques ou la verrerie se stérilisent relativement rapidement. Les matériaux poreux comme les textiles ou les articles à l'intérieur de sacs à filtre nécessitent des cycles plus longs pour que la vapeur déplace l'air et entre en contact avec chaque surface.
Liquides
La stérilisation des liquides, tels que les milieux dans des flacons, nécessite un temps de cycle beaucoup plus long. Cela est dû au fait qu'un grand volume de liquide met beaucoup plus de temps à chauffer à la température cible qu'un objet solide.
Pièges courants à éviter
Comprendre le potentiel d'échec est tout aussi important que de connaître la procédure standard. Une mauvaise évaluation des paramètres du cycle peut entraîner une perte de temps, des marchandises endommagées ou une stérilisation incomplète.
Le risque d'un temps insuffisant
Le danger le plus évident est une stérilisation incomplète. Si le temps d'exposition est trop court pour le type de charge, les micro-organismes — en particulier les spores — peuvent survivre. Cela peut entraîner une contamination, des expériences ratées et des risques importants pour la sécurité.
Le risque d'un temps excessif
Faire fonctionner un cycle trop longtemps peut également être préjudiciable. Une sur-stérilisation peut dégrader certains plastiques, émousser les bords tranchants des instruments et potentiellement décomposer les composants chimiques des milieux de laboratoire. C'est aussi une utilisation inutile d'énergie et de temps.
Faire le bon choix pour votre objectif
Consultez toujours le manuel de votre autoclave spécifique et les protocoles de votre institution. Cependant, vous pouvez utiliser ces principes généraux pour guider vos décisions.
- Si votre objectif principal est de stériliser de la verrerie de laboratoire standard ou des instruments métalliques non emballés : Un cycle de 15 à 20 minutes à 121°C est la norme fiable de l'industrie une fois que la chambre atteint la température.
- Si votre objectif principal est de stériliser des liquides, des paquets denses ou de grands sacs de déchets biologiques : Augmentez le temps d'exposition à 30-60 minutes pour vous assurer que le cœur de la charge atteint la température cible.
- Si votre objectif principal est de stériliser des articles thermosensibles : Consultez les directives du fabricant, car vous pourriez avoir besoin d'une combinaison température/temps différente (par exemple, 134°C pendant une durée plus courte) ou d'une méthode de stérilisation entièrement différente.
En fin de compte, une autoclavation efficace repose sur la compréhension que le temps est un outil pour assurer une pénétration complète de la vapeur et n'est pas un réglage universel.
Tableau récapitulatif :
| Facteur | Impact sur le temps de stérilisation |
|---|---|
| Taille et densité de la charge | Les charges plus grandes et plus denses nécessitent des temps plus longs (par exemple, 30 à 60 minutes) pour la pénétration de la vapeur. |
| Type de matériau | Les matériaux poreux (textiles, sacs) nécessitent plus de temps que les articles non poreux (verre, métal). |
| Liquides | Extension significative nécessaire en raison du chauffage lent (par exemple, 30 à 60 minutes). |
| Cycle standard | 15 à 20 minutes à 121°C pour les articles simples et non emballés après que la chambre ait atteint la température. |
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