Si l'autoclavage n'est pas adapté à la stérilisation des milieux de culture, une méthode alternative est la suivantela stérilisation par filtration. Cette méthode consiste à faire passer le milieu de culture à travers un filtre dont les pores sont suffisamment petits pour piéger les micro-organismes, ce qui permet de les éliminer efficacement du milieu sans l'exposer à la chaleur.
Résumé de la stérilisation par filtration :
La stérilisation par filtration est un procédé qui consiste à stériliser les milieux de culture en les faisant passer à travers un filtre dont les pores sont très petits, généralement 0,22 micron, et qui sont capables de piéger les bactéries, les virus et d'autres micro-organismes. Cette méthode est particulièrement utile pour les milieux thermosensibles dont les composants risquent d'être dégradés par la chaleur.
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Explication détaillée :
- Principe de la filtration :
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La stérilisation par filtration repose sur la barrière physique que constituent les filtres dont les pores sont suffisamment petits pour empêcher le passage des micro-organismes. La taille standard des pores de la plupart des filtres biologiques est de 0,22 micron, ce qui permet de piéger efficacement les bactéries et la plupart des virus.
- Équipement utilisé :
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Le principal équipement utilisé pour la stérilisation par filtration comprend des filtres à seringue, des systèmes de filtration sous vide ou des unités de filtration sous pression. Ces systèmes sont conçus pour traiter différents volumes de milieux et peuvent être adaptés à divers besoins du laboratoire.
- Procédure :
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Le milieu de culture est préparé comme d'habitude, mais au lieu d'être stérilisé à l'autoclave, il passe à travers le filtre. Cela peut se faire en versant le milieu dans une seringue équipée d'un filtre, puis en expulsant le milieu à travers le filtre dans un récipient stérile. Pour les volumes plus importants, on utilise une installation de filtration sous vide ou sous pression.
- Avantages :
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Le principal avantage de la stérilisation par filtration est qu'elle n'implique pas de chaleur, ce qui la rend idéale pour les milieux contenant des composants thermolabiles. Cette méthode permet également de stériliser des milieux susceptibles d'être altérés par la chaleur, tels que ceux contenant des enzymes, des vitamines ou d'autres additifs sensibles à la chaleur.
- À prendre en considération :
Bien que la filtration soit efficace, elle nécessite une manipulation soigneuse pour s'assurer que le filtre ne se bouche pas et que le processus se déroule dans des conditions stériles afin d'éviter toute recontamination. En outre, le coût des filtres et de l'équipement nécessaire à la filtration peut être plus élevé que le coût associé à l'autoclavage.Conclusion :
La stérilisation par filtration est une alternative viable à l'autoclavage pour les milieux de culture, en particulier lorsqu'il s'agit de composants sensibles à la chaleur. Elle permet d'obtenir la stérilité sans compromettre l'intégrité des milieux, ce qui en fait une technique essentielle en microbiologie et dans d'autres laboratoires des sciences de la vie.
