La température à laquelle un rotovap doit être utilisé se situe généralement autour de 50°C, en particulier lorsqu'il est utilisé en conjonction avec un vide poussé. Ce réglage de la température est crucial pour une évaporation efficace sans endommager l'échantillon, en particulier lorsqu'il s'agit de composants délicats comme les peptides ou les protéines.
Explication du réglage de la température :
Le choix de 50°C est stratégique car il permet d'équilibrer le besoin d'une chaleur suffisante pour faciliter l'évaporation et la nécessité d'éviter la surchauffe des matériaux sensibles. Sous un vide poussé, le point d'ébullition des solvants est considérablement réduit, ce qui leur permet de s'évaporer à des températures plus basses qu'à la pression atmosphérique normale. Ceci est particulièrement important lorsque l'échantillon comprend des molécules biologiques délicates qui peuvent se dénaturer ou se dégrader à des températures plus élevées.Rôle du vide :
- Le vide poussé est essentiel pour abaisser le point d'ébullition des solvants, ce qui permet de travailler à des températures plus basses. Les sources de vide traditionnelles, telles que les pompes péristaltiques ou les aspirateurs, sont insuffisantes à cette fin, car elles ne peuvent pas atteindre les basses pressions (de l'ordre du mTorr) nécessaires à un fonctionnement efficace de la rotovaporisation. Il est donc recommandé d'utiliser une pompe à vide robuste capable d'atteindre ces basses pressions.Étapes opérationnelles :
- Démarrer la pompe à vide : Commencez par démarrer la pompe à vide et laissez-la descendre pendant quelques minutes avant d'injecter l'échantillon. Cette mise sous vide initiale permet de s'assurer que le système est prêt à fonctionner.
- Amorcer le Rotovap : Une fois que le vide est stable et affiche une faible valeur, injecter un petit volume (20 % du total) de liquide dans la valve de la rotovap. Le processus d'évaporation commence lorsque la température du refroidisseur augmente légèrement.
Ajuster l'injection : Surveillez la température ; lorsqu'elle se stabilise ou commence à baisser, ouvrez lentement la vanne d'injection pour introduire davantage de liquide dans le ballon rotatif. L'objectif est de faire correspondre les taux d'entrée et de sortie pour maintenir un processus stable.
Conclusion :
