La stabilité de l'ARN dépend fortement de la température, les taux de dégradation variant considérablement selon les conditions de stockage.Alors que l'ARN reste stable pendant de longues périodes à des températures très basses (de -20°C à -80°C), son intégrité diminue progressivement à des températures plus élevées, en particulier au-dessus de 4°C.Le stockage à court terme à température ambiante est possible mais comporte des risques de dégradation plus élevés que dans des conditions de réfrigération ou de congélation.
Explication des points clés :
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Stockage à très basse température (-20°C à -80°C)
- L'ARN reste stable pendant des mois, voire des années, lorsqu'il est stocké à -20°C ou -80°C.
- Les cycles répétés de congélation-décongélation (jusqu'à 10 fois) ne dégradent pas l'ARN de manière significative, ce qui rend ces températures idéales pour la conservation à long terme.
- Toutefois, les congélateurs sans givre doivent être évités en raison des fluctuations de température qui peuvent compromettre la stabilité.
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Stockage réfrigéré (4°C)
- L'ARN peut être conservé à 4°C jusqu'à 14 jours sans dégradation significative.
- L'évaporation des tampons de stockage peut se produire au fil du temps, il est donc recommandé de fermer hermétiquement les tubes.
- Convient pour des expériences à court terme mais n'est pas idéal pour un stockage prolongé.
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Température ambiante (20-25°C)
- L'ARN reste stable pendant environ 48 heures à température ambiante, mais les risques de dégradation augmentent au-delà de cette période.
- La contamination par la RNase ou l'exposition à la lumière UV peut accélérer la dégradation, c'est pourquoi les précautions de manipulation sont essentielles.
- Il est préférable de l'utiliser pour un traitement immédiat plutôt que pour le stockage.
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Facteurs critiques influençant la stabilité de l'ARN
- Contamination par la RNase:Même des quantités infimes de RNases peuvent dégrader rapidement l'ARN. Il est donc essentiel d'utiliser des tubes et des réactifs exempts de RNases.
- Composition du tampon:Le stockage dans des tampons inhibiteurs de RNase (par exemple, tampon TE ou solutions commerciales de stabilisation de l'ARN) améliore la stabilité.
- Concentration de l'échantillon:L'ARN dilué se dégrade plus rapidement ; les échantillons concentrés sont plus résistants.
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Recommandations pratiques pour les acheteurs
- Donner la priorité des consommables exempts de RNase (tubes, pointes) pour minimiser les risques de contamination.
- Pour les laboratoires ne disposant pas de congélateurs ultra-bas, réactifs de stabilisation de l'ARN (par exemple, RNA later) peuvent prolonger la stabilité à température ambiante.
- Envisager l'utilisation d'ARN l'ARN lyophilisé lyophilisé pour les applications nécessitant un stockage à température ambiante, car il résiste mieux à la dégradation que les échantillons liquides.
En comprenant ces profils de stabilité en fonction de la température, les chercheurs et les acheteurs peuvent prendre des décisions éclairées sur la manipulation de l'ARN, l'équipement de stockage et les consommables afin de garantir l'intégrité de l'échantillon.
Tableau récapitulatif :
| Température de stockage | Stabilité Durée | Principales considérations |
|---|---|---|
| De -20°C à -80°C | Mois à années | Éviter les congélateurs sans givre ; stable même après de multiples cycles de congélation-décongélation. |
| 4°C (au réfrigérateur) | Jusqu'à 14 jours | Fermer hermétiquement les tubes pour éviter l'évaporation du tampon. |
| Température ambiante (20-25°C) | ~48 heures | Risque élevé de dégradation ; utiliser une manipulation sans RNase. |
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