Lorsqu'il s'agit d'imagerie IR d'échantillons biologiques, l'une des techniques les plus efficaces est latechnique de Nujol mull. Cette méthode consiste à préparer l'échantillon biologique en le réduisant en poudre fine, puis en le mélangeant à du Nujol, une sorte d'huile minérale. Le mélange est ensuite étalé sur des plaques de sel, généralement en KBr ou NaCl, qui sont transparentes au rayonnement IR. Enfin, l'échantillon est placé sur le trajet d'un faisceau IR pour l'analyse spectroscopique.
Quelle technique pourrait être utilisée pour l'imagerie IR d'échantillons biologiques ? (4 étapes pour maîtriser la technique de Nujol Mull)
1. Préparation de l'échantillon
La première étape de la technique de Nujol Mull consiste à préparer l'échantillon biologique. Il s'agit de broyer l'échantillon, qui peut être constitué de tissus, de cellules ou d'autres matériaux biologiques, pour en faire une fine poudre. L'objectif est de réduire la taille moyenne des particules à environ 1 à 2 microns. Cela garantit que les particules sont suffisamment petites pour transmettre efficacement la lumière infrarouge.
2. Mélange avec Nujol
L'échantillon finement broyé est ensuite mélangé avec du Nujol, un type d'huile minérale. Le Nujol agit comme un agent moussant, aidant à former une pâte homogène avec l'échantillon en poudre. L'un des avantages de l'utilisation du Nujol est qu'il n'absorbe pas de manière significative dans la région IR. Cela permet d'observer clairement le spectre de l'échantillon biologique.
3. Application sur plaques de sel
Le mélange Nujol-échantillon est ensuite appliqué sur une face d'une plaque de KBr ou de NaCl. Une autre plaque est placée par-dessus et le mélange est étalé uniformément entre les plaques par un léger mouvement de frottement. Le film obtenu doit être légèrement translucide et exempt de bulles, ce qui indique une préparation correcte.
4. Analyse IR
Enfin, l'échantillon préparé est analysé à l'aide d'un spectromètre IR. Le rayonnement IR traverse le film mince et l'absorption de longueurs d'onde spécifiques par les molécules biologiques fournit des informations sur leur structure et leurs groupes fonctionnels.
Cette méthode est particulièrement adaptée aux échantillons biologiques car elle permet d'analyser des échantillons difficilement solubles ou susceptibles de se dégrader en solution. La technique du Nujol mull est simple, relativement rapide et ne nécessite pas d'équipement coûteux, ce qui la rend accessible à différents types de laboratoires.
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